نوع مقاله : علمی - پژوهشی
چکیده
هدف: هدف از این تحقیق شناسایی ژنهای ناحیه 2 دارای عدم تعادل آللیک با استفاده از روش‌های بیوانفورماتیک و سپس انتخاب و مطالعه برخی از آن‌ها با استفاده از روش هیبریداسیون درجا بود.
مواد و روشها: تومورهای تائید شده توسط متخصص پاتولوژی برای کشت سلولی مورد استفاده قرار گرفت. کروموزومهای متافازی با روش‌های متداول تهیه گردید. سپس پراب ژنهای مربوطه نشاندار شده جهت انجام هیبریداسیون بر روی اسلایدها ریخته شد. سپس مرحله آشکارسازی پرابهای نشاندار انجام شد. اسلایدها توسط میکروسکوپ فلورسانس و با استفاده از نرم افزار CW4000 Laica مورد مطالعه قرار گرفتند.
نتایج: با استفاده از پایگاههای اطلاعاتی در ناحیه مورد مطالعه 104 ژن شناسایی گردید ولی بسیاری از آن‌ها دارای عملکرد مشخص نبودند. بر اساس نتایج حاصل از روش هیبریداسیون درجا FISH: Fluorescence in situ hybridization) مشخص شد که ژنهای Fermt2, Socs4 و Dlgap5 دارای فزونییابی ژنی و Lgals3 دارای کاهش تعداد نسخه ژنی بودند.
نتیجه گیری: احتمالا دو ژن Socs4 و Dlgap5 از جمله ژنهایی میباشند که در بروز سرطان رحم نقش موثر دارند.
کلیدواژه‌ها
عنوان مقاله [English]
Bioinformatics and Molecular Cytogenetic Study of a Small Region of Chromosome 15 Including Allelic Imbalances in Uterine Cancer Prone Inice
چکیده [English]
Aim: Previous studies using LOH technique on BDII rats showed four distinct Allelic imbalance on chromosome 15. In this research we have studied region 2 including Allelic imbalance by bioinformatic approachs and FISH (Florescence in situ hybridization) technique.
Material and Methods: The confirmed tumors by an expert pathologist were used for cell culture. Metaphase chromosomes were prepared by conventional methods. The corresponding genes labeled probe for hybridization was poured onto slides. The labeled probe was then subjected to detected phase. Slides were studied under a fluorescence microscope using software CW4000 Laica.
Results: Using some of the database we could register 104 genes. But most of them did not have a clear function. According of FISH results, Dlgap5, Fermt2 and Socs4 had amplification and Lgals3 had copy number reduction.
Conclusion: according to our results, the Dlgap5 and Socs4 are probably involve in EAC
کلیدواژه‌ها [English]
- Endometrial adenocarcinomas
- Fish
- Paint
- Rat
مقدمه
تاکنون بیش از 200 نوع سرطان‌های مختلف شناسایی شده است و از جمله شایع‌ترین آن‌ها در خانم‌ها و در کشورهای صنعتی، سرطان رحم است. سرطان یک بیماری واحد که یک اندام خاص را درگیر نماید و یا علت مشخص داشته باشد نیست بلکه نامی است برای گروه بزرگی از بیماری‌ها که رشد غیرقابل کنترل سلول‌ها را همراه داشته و به شکل یک توده در میآید و یا اینکه به بافت‌های مجاور تهاجم کرده و در عمل طبیعی آن‌ها اختلال ایجاد می‌نماید و اگر درمان نشود کشنده است. مطالعه در مورد سرطان بهمنظور یافتن ژنهای درگیر در بروز آن میتواند در یافتن راه‌های موثرتری در درمان این دسته از بیماری‌های ژنتیکی مهم می‌باشد. یکی از روش‌های متداول برای حصول چنین نتایجی مطالعه تغییرات ایجاد شده در ریخته ژنتیکی فرد بیمار می‌باشد. به عبارت دیگر بررسی کروموزومی سلول‌های توموری در کسب اطلاعات مورد نیاز، از مهمترین و اصلی‌ترین راه‌های آزمایشگاهی است (1). در سه دهه گذشته، محققین اطلاعات زیادی را درباره ژنها و پروتئین‌ها و نقش آن‌ها در تولید سلول‌های طبیعی و سرطانی گزارش کرده‌اند. یکی از اکتشافات مهم آن‌ها نقش ژنها جهش یافته در تولید سلول‌های سرطانی بوده است. عوامل محیطی که باعث موتاسیونهای ژنتیکی میشوند در حال شناسایی هستند. همچنین با کمک از روش‌های مختلف مولکولی، میتوان قدرت بیان ژنها و پروتئین‌های معیوب را تعیین نمود. حتی پیدا کردن بیومارکرهای جدید که شاخص یکنوع سرطان هستند در تشخیص زودرس و معالجه بهموقع بیماری سرطان کمک‌های شایان توجهی را می‌نماید (2). سرطان یکی از شایع‌ترین و شدیدترین بیماریهایی است که در پزشکی بالینی دیده میشود. آمار نشان میدهد که بیش از یک سوم جمعیت به یکی از اشکال سرطان مبتلا میشوند. بیش از 20 درصد مرگ ها در اثر سرطان اتفاق میافتد و در کشورهای توسعه یافته بیش از 10 درصد کل هزینه مراقبتهای پزشکی برای سرطان صرف میشود. سرطان در اثر عدم درمان به طور حتم به مرگ منجر خواهد شد (3). در مطاله قبلی (4) در کروموزوم شماره 15، موش های نژاد BDII چهار ناحیه دارای عدم تعادل آللیک (Allelic Imbalance) شناسایی گردید. ناحیه 2 این کروموزوم از Mb 21 تا Mb 24 را شامل میگردد. در آن مطالعه، ناحیه 2 کروموزوم 15 تومورهای (EAC) Endometrial adenocarcinomas دارای عدم تعادل آللیک را بین 20 الی 23 مگا جفت باز پیشنهاد شد و در آن 37 ژن شناسایی که 18 تای آن‌ها ژنهای شناخته شده دارای عملکرد مشخص بوده و 9 ژن در سرطان‌های مختلف دخالت مینموده است که بهعنوان ژنهای سرطانی نامگذاری شدند. ولی در این تحقیق برای افزایش دقت در انتخاب ژنهای مستقر در ناحیه دارای AI، ژنهای بین 19 الی 25 مگا جفت باز مورد بررسی و شمارش مجدد قرار گرفت. با توجه به کشف ژنهای جدید از زمان چاپ مقاله تا تحقیق حاضر ملاحظه میگردد که تعداد ژنهای این ناحیه 108 ژن که دارای نام علمی و عملکرد مشخص میباشند، تعیین و شناسایی شده است که از آن میان 26 ژن بهطور دقیق شناخته شده است و اطلاعات آن‌ها با توجه به پایگاههای اینترنتی مانند NCBI و همچنین محل سیتوژنتیک آن‌ها بر روی کروموزوم انسانی و عملکرد ژن نیز تعیین گردید. همچنین با مطالعه مقالات مختلف نقش آن‌ها در بیماری‌های متفاوت بهخصوص در سرطان نیز مورد بررسی قرار گرفت و هر یک از این ژنها در یک یا چند سرطان (بهجز سرطان آندومتر) دخالت داشتهاند و لذا ژن های سرطانی نامیده میشوند. در این تحقیق 12 عدد از این ژنهای سرطانی که در ناحیه II کروموزوم 15 موشهای مبتلا به اندومتریوم آدنوکارسینومای آندومتر (EAC) شرکت داشتند، با استفاده از تکنیک روش هیبریداسیون در جا (FISH: Fluorescence in situ hybridization) و پینت (Paint) مورد بررسی و مطالعه قرار گرفتند.
مواد و روشها
نژاد پرورشیBDII مستعد بروز EAC می باشد (5). در این تحقیق موشهای صحرائی ماده نژاد BDII/Han با رعایت قوانین حقوق حیوانات با موشهای صحرائی نر از دو نژاد BN/Han و SPRD-Cu3/Han آمیزش داده شدند. بهمنظور تولید نسلF2 زادههای نسل F1 با هم و برای تولید زادههای بک کراس، نرهای نسل اول با موشهای صحرائی ماده والد آمیزش داده شدند. برای مشخص شدن ظهور تومور در زادههای حاصل از آمیزش، حیوانها بهطور منظم مورد بررسی ظاهری قرار میگرفتند. هنگامیکه تومور ظاهر میشد موش صحرایی با رعایت حقوق حیوانات و با استفاده از اتاقک کلروفرم بیهوش و کشته میشدند. در این تحقیق 10 تومور و 12 ژن مورد مطالعه قرار گرفت و از نظر پاتولوژیکی در همگی آن‌ها EAC تشخیص داده شدند.
تکنیکهایFISHوpain: برای تهیه کروموزومهای متافازی، به سلول‌های حاصل از کشت کلشیسین (05/0 میلیگرم بر میلیلیتر) به مدت 20 دقیقه اضافه گردید. هاروست سلول‌ها با تکان دادن شدید فلاسکهای کشت انجام گردید و سپس سلول‌ها توسط عمل سانتریفوژ تهنشین شدند.
پلیت سلولی حاصل در075/0 مول کلرید پتاسیم مجددا معلق گردید و 15 دقیقه در هوای آزمایشگاه قرار گرفت. عمل تثبیت سلول‌ها با فیکساتیو کارنوی انجام گرفت. اسلایدهای تهیه شده در هوای آزمایشگاه خشک شد و در الکل 70 درصد و در 20- تا زمان استفاده نگهداری گردید.
تکنیک FISH به روش پینکل (6) و با کمی اصلاحات انجام گرفت. کلونهای BAC حامل ژنهای مورد مطالعه با استفاده از برنامه بک-فایندر در پایگاه اطلاعاتی Ratmap به آدرس اینترنتی (http://ratmap.org/bacfinder/bacfinder/) تعیین گردید و سپس از BACPACorders@chori.org خریداری شد. کلونهای بک توسط بیوتین و دایگوکسینان (Boehringer-Mannheim, Mannheim, Germany) و با استفاده از روش نیک ترنسلیشن nick translation و در درجه حرارت 16 درجه سانتیگراد و به مدت 90 دقیقه نشاندار شدند(Nick Translation System, GibcoBRL, Life Technologies, Gaithersburg, MD). پراب ها همراه با DNA موش صحرائی سونیکیت شده رسوب داده شده و دوباره در 20 میلی لیتر بافر هیبریداسیون شامل فرمآمید 50 درصد، سولفات دکستران 10 درصد و 2X SSC حل گردید. پرابها برای مدت 5 دقیقه در 75 درجه سانتیگراد دناتوره شدند و بهطور دوتایی به اسلایدهای حاوی کروموزومهای متافازی که قبلا در فرمآمید 70 درصد و 2X SSC برای 2 دقیقه در 72 درجه سانتیگراد دناتوره شده بودند، اضافه گردید. هیبریداسیون پرابها در اتاق مرطوب و در درجه حرارت 37 درجه سانتیگراد بهمدت 48 ساعت انجام شد و بهدنبال آن در فرمآمید 50 درصد و 2X SSC بهمدت 15 دقیقه و در درجه حرارت 45 درجه سانتیگراد شستشو داده شد.
آشکارسازی پرابها توسط اضافه کردن FITC کنجوگیت با آودین و رودامین آنتی دایگوکسی ناین (Oncor, Gaithersburg, MD) انجام گرفت. نهایتا کروموزومها توسط DAPI رنگ آمیزی و تصاویر دیجیتالی متافازهای رنگ آمیزی شده با DAPI، FITC و رودامین توسط میکروسکوپ فلورسانس Olympus B51x و دوربین CCD تهیه گردید سپس آنالیز کروموزومها بهوسیله نرم افزار لایکا Leica Q-FISH انجام شد.
از آنجائیکه پراب اخصاصی Paint برای کروموزوم 15 موش صحرائی RNO15 وجود ندارد لذا از پراب های اختصاصی کروموزوم 14 موش خانگی MMU14 (Biocom. inc) برای این منظور استفاده شد.
نتایج
در این تحقیق پراب paint کروموزوم 14 موش برای مجموعه 10تایی از تومورهای EAC بهکار برده شد. بر اساس نتایج بهدست آمده آرایش کروموزوم 15 در هر یک از تومورها قابل شناسائی بود. نتایج نشان داد که اکثریت کروموزومهای پینت مثبت paint-positive به ظاهر کروموزومهای 15 سالم بودند. همچنین کروموزومهای مشتق شده از کروموزوم 15 (RNO15-derived) نیز مشاهده گردید که بهطور آشکار دچار حذف شدگی و جابجایی شده بودند ( شکل4).
آنالیز اطلاعات بدست آمده از تکنیکFISH در این تحقیق نشان داد که برخی از ژنها دارای افزایش تعداد نسخههای ژنی بودند و همچنین، 3 تا از نمونهها فزونییابی ژنی را برای یک یا چند ژن در کروموزوم 15 موشهای مبتلا به سرطان رحم نشان دادند (جدول 1). گاهی این فزونییابی بهصورت خوشهای از سیگنالها بوده و گاهی تعداد این نسخههای ژنی متعادل تر بوده و معمولا بین 10 تا 15 افزایش تعداد را نشان میداد که مثالهایی از آن در اشکال 1 الی 5 قابل مشاهده است.
شکل 1: سیگنالهای بهدست آمده از هیبریداسیون پرابهای نشاندار ژن Fermt2 بر کروموزومهای متافازی حاصل از تومور NUT50
شکل 2 : سیگنالهای بهدست آمده از هیبریداسیون پراب های نشاندار ژن (green) Dlgap5 و ژن Gata4 (red) بر کروموزومهای متافازی حاصل از تومور Rut30.
شکل 3 : سیگنالهای بهدست آمده از هیبریداسیون پرابهای نشاندار ژن Fgf14 (red) و ژن Gmfb (green) بر کروموزومهای متافازی حاصل از تومور .NUT55
معمولا در تومورها فقدان سیگنال، تنها در زیر گروهی از جمعیت سلولی دیده شد ولی بهطور کلی در مجموعه توموری مورد مطالعه در اکثریت سلول‌ها در بین زادههای NUT100 و NUT130 کاهش نسخه های ژنی مشاهده گردید.
شکل 4: سیگنالهای بهدست آمده از هیبریداسیون پرابهای نشاندار ژن Lgals3 بر کروموزومهای متافازی حاصل از تومور NUT100.
شکل 5 : سیگنالهای بهدست آمده از هیبریداسیون پرابهای نشاندار ژن (green)Rb1 و ژن Ptger2(red) بر سلول‌های اینترفازی حاصل از تومور Rut1.
نتایج بدست آمده از انجام روش FISH بر 10 تومور بدست آمده از آمیزش رت های نژاد BDII با رت های نژاد SPRD و BN، با استفاده از 12 ژن مستقر در ناحیه 2 دارای عدم تعادل آللیک در جدول شماره 1 خلاصه شده است.
جدول 1: نتایجبهدستآمدهازانجامهیبریداسیوندرجا (FISH)بااستفادهازپرابهاینشاندار 12 ژنمهمدرناحیهدارایعدمتعادلآللیکبررویکروموزومشمارهپانزدهرتهاینژادBDIIمبتلابهتومورآدنوکارسینومای آندومتر.
در جدول فوق مشاهده میگردد که ژن های Dlgap5 ، Socs4 و Fermt2 بهترتیب بیشترین درجه فزونی یابی ژنی را در بین تومورهای زادههای مختلف حاصل از آمیزش بهخود اختصاص دادهاند. همچنین کاهش نسخههای ژنی مربوط به ژن Lgals3 در تومورهای حاصل از دو گروه از زاده ها (NUT100 و NUT130) مشاهده گردید.
بحث
یافتههای روش CGH بر روی تومورهای EAC نشان داد که RNO15 به کررات دچار انحرافات کروموزومی شده است بهطوریکه حذف در بازوی کوتاه و محل قرارگیری تغییرات copy number changes در بازوی بلند کروموزوم بهوقوع پیوسته است (7). در مطالعه قبلی یک مجموعه 36 تائی از مارکرهای میکروساتلیت که طول کروموزوم 15 رت (RNO15) را میپوشاند برای بررسی عدم تعادل آلیلیک (AI) Allelic imbalance مورد استفاده قرار گرفت (7). در آن مطالعه چهار ناحیه کروموزومی که تحت تاثیر AI قرار گرفته بودند شناسائی گردید. دو ناحیه در بخش دیستال بازوی کوتاه، یک ناحیه در بخش میانی کروموزوم 15 که احتمالا شامل سانترومر نیز میگردید و ناحیه چهارم در قسمت دیستال بازوی بلند کروموزوم واقع شده بود.
در تحقیق حاضر 12 ژن مستقـر در ناحیه 2 دارای عـدم تعـادل
آللیک که در ناحیه Mb25-Mb19 امتداد داشت، با استفاده از تکنیک FISH مورد بررسی قرار گرفت. آنالیز اطلاعات بهدست آمده با استفاده از این روش نشان داد که، ژنهای Dlgap5، Socs4 و Fermt2 بهترتیب بیشترین درجه فزونی یابی ژنی، در بین تومورهای زادههای مختلف حاصل از آمیزش را بهخود اختصاص دادهاند.
|
|
نقش ژن Dlgap5 در تنظیم چرخه سلولی همچنین در hepatocellular carcinoma گزارش شده است (8)علاوه بر آن، دخالت این ژن در سرطان روده (9) و سرطان پستان (10) ثابت شده است. ا از آنجائیکه دخالت این ژن در سرطان‌های مختلف گزارش شده است و همچنین نتایج این تحقیق که همفزونییابی این ژن را در تومورهای آدنوکارسینومای آندومتر نشان داده است لذا بهنظر میرسد این ژن بهعنوان یک ژن کاندیدا در بروز سرطان آندومتر بایستی مورد بررسی دقیق تر قرار گیرد.
ژن Socs4 نیز در این تحقیق رفتار مشابهی را نشان داد. محصول ژنی آن در تنظیم انتقال سیگنال سیتوکنینها دخالت دارد؛ همچنین گزارش شده است که در سرطان پستان بیان این ژن افزایش می یابد (11). علاوه بر این، تحقیقات نشان داده است که این ژن در سرطان سلول‌های سنگفرشی ششها نیز دخالت دارد (12). لذا با توجه به عملکرد این ژن در سرطان‌های ذکر شده و گزارش فزونییابی آن ژن در تحقیق حاضر، این ژن میتواند بهعنوان یک ژن کاندید برای تحقیقات بیشتر مورد بررسی قرار گیرد.
بر اساس برخی از تحقیقات محصول ژن Fermt2 در گردآوری و انباشتن آکتین و شکل سلولی دخالت داشته و این ژن در سرطان مثانه (13) و همچنین در آدنوکارسینومای ششها (14) دخالت دارد.
در کروموزوم های متافازی بهدست آمده از کشت سلولی تومورهای مشاهده شده در زاده های RUT2 شکستگی در کروموزوم 15 نشان داد که بخش اصلی حاصل از این شکستگی به کروموزوم مارکری متصل گردیده است (جابجایی) (شکل 4). در حال حاضر اهمیت این کروموزوم مارکر در فرایند تشکیل سرطان نمیتواند حدس زده شود و نیاز به مطالعات بیشتر و دقیقتری دارد. با این وجود، یک احتمال آن است که افزایش نسخه های ژنی مشاهده شده در این تحقیق، احتمالا در تشکیل و پیشرفت سرطان EAC نقش کلیدی دارد. احتمال دیگر آن است که شکستگی که در این کروموزومهای مارکر بهوجود میآید موجب غیر فعال شدن یک ژن سرکوبگر توموری گردیده است که در این جایگاه سیتوژنتیکی قرار گرفته و در حال حاضر ناشناخته است.
فزونییابیهای ژنی و همچنین افزایش نسخههای ژنی مشاهده شده در این تحقیق در حالی گزارش میگردد که در مطالعه نواربندی کروموزوم 15 در نمونههای مطالعه شده هیچگونه تغییر قابل گزارشی مشاهده نشد ، لذا این فزونییابیهای ژنی بهصورت مخفی در کروموزوم گزارش می گردد.
وقوع یک فزونییابی ژنی مخفی در کروموزوم 15 بسیار مهم بهنظر میرسد. فزونییابی ژنی معمولا همراه با برخی علائم سیتوژنتیکی خاص به وقوع میپیوندد؛ بهعنوان مثال وجود homogeneously staining regions (hsr) یا نواحی رنگ آمیزی شده بهطور یکنواخت در کروموزوم متافازی نواربندی شده به روشG-banding و یا مشاهده دابل ماینوت (dmin) از جمله علائم سیتوژنتیکی است که میتواند نشانه فزونییابی ژنی باشد (15). اما فزونییابی ژنی مشاهده شده در کروموزوم 15 (تحقیق حاضر) کاملا متفاوت بهنظر میرسد. چنانچه در بیشتر موارد این فزونییابی منجر به هیچگونه تغییر آشکاری در مورفولوژی کروموزوم 15 نگردیده است.
نتیجه گیری
آنالیز با روش CGH نشان داد بود که کروموزوم 15 محل تغییرات copy number در تومورهای EAC می باشد (5) این تغییرات توسط روش FISH مورد تجزیه و تحلیل قرار گرفت و نشان داده شد که چندین مکانیسم مختلف (مانند جابجائی یک جانبه و فزونییابی ژنی و افزایش نسخه ژنی همچنین کاهش نسخه های ژنی) در کروموزوم فعال گردیده است.
نتایج این تحقیق نشان میدهد چند ژن مهم در بروز EAC در ناحیه 2 دارای AI کروموزوم 15 رت های مبتلا به EAC قرار گرفته است. تحقیقات دقیقتر نیاز می‌باشد تا نوع تغییرات و چگونگی آن‌ها را نشان دهد.
تشکر و قدردانی
بدینوسیله از کمک‌های مالی معاونت محترم پژوهشی دانشگاه اراک و همچنین از آقای دکتر فرامرز اسدی و دکتر علی رضا شهرجردی از دانشگاه بمبئی هند برای در اختیار قرار دادن برخی از BAC های مورد استفاده در این تحقیق و همینطور کمک‌های آقای فراهانی و سرکار خانم محمدی در انجام امور آزمایشگاهی، تشکر و سپاسگزاری میگردد. شماره قرارداد این طرح 3608/90و تاریخ آن 25/4/90بوده است.
- Holland, J.F, Frei, E, et al. Holland-Frei cancer medicine 6th Ed. New york, BC Decker inc; 2003 Chapter 6&7.
- Schwab M. "Oncogene amplification in solid tumors."Seminars in Cancer Biology. 1999; 9(4): 319-325.
- Thompson & Thompson Genetics in Medicine, 7th Ed. By Robert L. Nussbaum, MD, Roderick R. McInnes, MD, PhD, FRS(C) and Huntington F. Willard, PhD; 2011.
- Hamta A, Talebbeigy F. Recurrent Regional Allelic Imbalance in Chromosome 15 in Rat Endometrial Adenocarcinomas. Yakhteh Medical Journal. 2010; 12(1): 59-72.
- Helou K, Walentinsson A, Levan G, Stahl F. "Between rat and mouse zoo-FISH reveals 49 chromosomal segments that have been conserved in evolution." Mammalian Genome 2001; 12(10): 765-771.
- Pinkel D, Landegent J, Collins C, Fuscoe J, R, et al. Fluorescence in situ hybridization with human chromosome-specific libraries: detection of trisomy
21 and translocations of chromosome 4. Proc Natl Acad Sci U S A. 1988 December; 85(23): 9138–9142.
- Hamta A, Adamovic T, Helou K, Levan G. "Cytogenetic aberrations patterns in spontaneous endometrial adenocarcinomas in a rat model as revealed by chromosome banding and comparative genome hybridization."Cancer Genet Cytogenet 2005; 159(2): 123-8.
- Tsou AP, Yang CW, Huang CY, Yu RC, et al. Identification of a novel cell cycle regulated gene, HURP, overexpressed in human hepatocellular carcinoma. Oncogene. 2003; 16; 22(2): 298-307.
- Loo LW, Cheng I, Tiirikainen M, Lum-Jones A, et al. cis-Expression QTL analysis of established colorectal cancer risk variants in colon tumors and adjacent normal tissue. PLoS One. 2012; 7(2):e30477. Epub. 2012; Feb 17.
10. Fuja TJ, Lin F, Osann KE, Bryant PJ. Somatic mutations and altered expression of the candidate tumor suppressors CSNK1 epsilon, DLG1, and EDD/hHYD in mammary ductal carcinoma. Cancer Res. 2004; Feb 1; 64(3): 942-51.
11. Sasi W, Jiang WG, Sharma A, Mokbel K. Higher expression levels of SOCS 1,3,4,7 are associated with earlier tumour stage and better clinical outcome in human breast cancer. BMC Cancer. 2010 Apr; 30: 10:178.
12. Sriram KB, Larsen JE, Savarimuthu Francis SM, Wright CM, et al. Array-comparative genomic hybridization reveals loss of SOCS6 is associated with poor prognosis in primary lung squamous cell carcinoma. PLoS One. 2012; 7(2): e30398. Epub. 2012; Feb 17.
13. Talaat S, Somji S, Toni C, Garrett SH, et al. Kindlin-2 expression in arsenite- and cadmium-transformed bladder cancer cell lines and in archival specimens of human bladder cancer. Urology. 2011 Jun; 77(6): 1507.e1-7.
14. An Z, Dobra K, Lock JG, Strömblad S, et al. Kindlin-2 is expressed in malignant mesothelioma and is required for tumor cell adhesion and migration. Int J Cancer. 2010 Nov 1; 127(9): 1999-2008.
Schwab M. "Oncogene amplification in solid tumors."Seminars in Cancer Biology. 1999; 9(4): 319-325.
)