دانشگاه اراک سلول و بافت 2228-7035 9 3 2018 09 23 Anticancer activity of Blepharis persica seed hydroalcoholic extract on (MCF-7) human breast cancer and (LNCaP) prostate cancer cell lines and its synergistic effect with doxorubicin بررسی اثر ضد سرطانی عصاره هیدروالکلی بذر خارسنبل) ( Blepharis persica بر رده سلول‫های سرطانی سینه‌ و پروستات و اثر هم‌افزایی آن با داروی دوکسوروبیسین‬‬ 206 221 34388 10.52547/JCT.9.3.206 FA کیان آقاعباسی دانشجوی دکتری بیوتکنولوژی کشاورزی، دانشگاه گیلان، پردیس دانشگاهی، بخش بیوتکنولوژی کشاورزی، رشت، ایران حسن حسنی کومله دانشگاه گیلان، دانشکده علوم کشاورزی، گروه بیوتکنولوژی کشاورزی، رشت، ایران ناهید عسکری دانشگاه تحصیلات تکمیلی صنعتی و فناوری پیشرفته کرمان ، پژوهشکده علوم محیطی، پژوهشگاه علوم و تکنولوژی پیشرفته و علوم محیطی، گروه بیوتکنولوژی، کرمان، ایران 0000-0002-9462-1144 مسعود ترک زاده ماهانی دانشگاه تحصیلات تکمیلی صنعتی و فناوری پیشرفته کرمان ، پژوهشکده علوم محیطی، پژوهشگاه علوم و تکنولوژی پیشرفته و علوم محیطی، گروه بیوتکنولوژی، کرمان، ایران عبدالله رمضانی قرا دانشگاه جیرفت، دانشکده علوم، گروه زیست شناسی گیاهی، کرمان ، ایران Journal Article 2019 02 25 <strong>Aims: </strong>This study was aimed to investigate the anti-proliferative effects of hydroalcoholic extract of <em>Blepharis persica</em> seed and its synergy effect with doxorubicin on human breast cancer and prostate cancer cell lines. <br /><strong>Materials and Methods: </strong>hydroalcoholic extract of <em> </em>seed was prepared using maceration, and ethanol­%70. Eight concentrations of extract and four concentrations of combined with doxorubicin (125, 62.5ngr/ml) and extract (0.625, 0.315­mg/ml) were prepared. MCF7, LNCaP and SKM cell lines were cultured .Cell­­ viability was evaluated by MTT assay after 24­h. To <strong>s</strong>how apoptosis <em>induction</em>of breast and prostate­ cancer cell death by <em>extracts</em><strong>, </strong>Annexin/PI test were performed. <em>BCL₂</em>gene expression was analyzed using Real-Time RT-qPCRfor 24,48h. <br /><strong>Results: </strong>The highest effects of growth inhibition were observed in the prostate, breast and fibroblast cell lines with extract, respectively. The combined effect of doxorubicin with extract in three cell lines in comparison with control did not show any significant difference. The results of Annexin / PI indicated that the percentage of initial apoptosis, delayed  apoptosis and necrosis in treated cells increased compared to control. <em>BCL₂</em> expression in cell lines decreased significantly over 24 and 48 h compares to control(p < 0.01). <br /><strong>Conclusion</strong>: hydroalcoholic extract of <em>B.persica</em> seed has ability to inhibit the proliferation of cancer cell lines as well as the induction of apoptosis in cancer cells, compared with using it with doxorubicin, although the extract did not have any synergy effect with doxorubicin at lower concentrations, it can be a substituted for this kind of drug with fewer side effects. <br />  <strong>هدف:</strong> در این تحقیق اثرات ضد­سرطانی و آپوپتوزیسی عصاره هیدروالکلی بذر خارسنبل  <em>Blepharis persica</em> بر روی سلول­های سرطانی سینه­ و پروستات و اثر هم­افزایی آن با دارو دوکسوروبیسین مورد مطالعه قرار گرفت. <br /><strong>مواد و روش­ها:</strong> عصاره هیدروالکلی بذر با روش خیساندن و با اتانول ­70درصد تهیه شد. 8­ غلظت عصاره و 4 غلظت ترکیبی از دوکسوروبیسین (125و 5/62 نانوگرم بر میلی­لیتر) با عصاره غلظت­های (315/0و 625/0 میلی­گرم بر میلی­لیتر) تهیه شد. سلول‫های سرطانی سینه (MCF-7)­­­، پروستات (LNCaP) و سلول­های فیبروبلاست ­(SKM)کشت داده شدند. درصد زنده­مانی رده‫های سلولی با تست­­MTT اندازه­گیری و میزان آپوپتوزیس در رده­های سلولی از روش Annexin/PI سنجیده شد و بررسی بیان ژن <em>BCL2</em>­ در مدت 24 و 48­ ساعت با روش quantitative RT-PCR (RT-qPCR)   Real-Timeصورت گرفت.<br /><strong>نتایج:</strong> عصاره به­ترتیب بر رده­های سلولی پروستات، پستان و فیبروبلاست بیشترین اثر­ بازدارندگی رشد را نشان­ داد. اثر ترکیبی دوکسوروبیسین با عصاره در هر سه رده سلولی با کنترل هیچ­گونه تفاوت معناداری نداشت. نتایج Annexin/PI  نشان­داد میزان آپوپتوزیس اولیه، تاخیری و نکروز در رده­های سلولی تیمار شده نسبت به کنترل افزایش داشته است. بیان ژن<em>BCL₂</em>  در رده­های سلولی با تیمار غلظت 25/1 میلی­گرم بر میلی­لیتر عصاره گیاه در مدت 24 و 48 ساعت نسبت به ژن کنترل بتااکتین به­طور معنی­داری کاهش یافته بود (­01/0­p <).<br /><strong>نتیجه­گیری:</strong> عصاره هیدروالکلی بذر خارسنبل توانایی کاهش تکثیر سلول­های سرطانی سینه و پروستات و القا آپوپتوزیس در سلول­های سرطانی را دارد و هرچند که در غلظت کم موجب افزایش اثرات ضد سرطانی دوکسوروبیسین نمی­شود، ولی می­تواند جایگزنی برای آن با عوارض جانبی کمتر باشد.<br />  https://jct.araku.ac.ir/article_34388_9822beb9602ea7ea2f9791e1dc2faebc.pdf