حسن رهنما؛ ناهید احمدی
چکیده
هدف: بهمنظور بررسی کارایی پیشبر اختصاصی غده (Patatin1)، بیان آنتیژن HBsAg واکسن هپاتیت ب در گیاه سیبزمینی با استفاده از روش بیان موقت (اگرواینفیلتریشن) مورد ارزیابی قرار گرفت.مواد و روشها: پیشبر اختصاصی غده (Pat1) با استفاده از آغازگرهای اختصاصی با روش واکنش زنجیری پلیمراز (PCR) از گیاه سیب زمینی جدا شد. این پیشبر در بالادست ژن بهینهسازی ...
بیشتر
هدف: بهمنظور بررسی کارایی پیشبر اختصاصی غده (Patatin1)، بیان آنتیژن HBsAg واکسن هپاتیت ب در گیاه سیبزمینی با استفاده از روش بیان موقت (اگرواینفیلتریشن) مورد ارزیابی قرار گرفت.مواد و روشها: پیشبر اختصاصی غده (Pat1) با استفاده از آغازگرهای اختصاصی با روش واکنش زنجیری پلیمراز (PCR) از گیاه سیب زمینی جدا شد. این پیشبر در بالادست ژن بهینهسازی شده سنتزی HBsAg در ناقل دوگانه pBI121 همسانهسازی شد. بهمنظور مقایسه کارایی پیشبر اختصاصی Pat1، ژن HBsAg تحت کنترل پیشبر دایمی CaMV35S هم قرار داده شد. سازههای تهیه شده پس از انتقال به اگروباکتریوم با استفاده از روش اگرواینفیلتریشن به غدهها و برگهای گیاه سیبزمینی انتقال یافتند. بیان موقت آنتیژن HBsAg با استفاده از روش الایزا اندازهگیری شد. نتایج: بررسی بیان آنتیژن HBsAg در برگها و غدههای گیاه سیبزمینی نشان داد که پیشبر Pat1 بهطور اختصاصی باعث بیان بالای آن در بافتهای غدهای میشود. بیان اندک این آنتیژن تحت کنترل پیشبر Pat1 در بافتهای برگی هم گزارش شده و میتواند تاحدی به عوامل القاکننده در محیط تلقیح بستگی داشته باشند. در حالیکه بیان آنتیژن تحت پیشبر دایمی CaMV35S در تمامی بافتهای برگی و غدهای اتفاق میافتد. همچنین نتایج حاصل نشان داد که ژن HBsAg بهینهشده کدنی برای گیاه سیبزمینی بهخوبی عمل کرده و آنتیژن مربوط را بیان میکند.نتیجهگیری: نتایج این پژوهش نشان میدهد که از پیشبر اختصاصی غده سیبزمینی Pat1 همسانهسازی شده میتوان بهطور موثری برای بیان دایمی آنتیژن سنتزی بهینهسازی شده کدنی HBsAg در گیاهان تراریخت سیبزمینی استفاده کرد.
