هاتف قاسمی حمیدآبادی؛ مریم نظم بجنوردی؛ نورالله رضایی
چکیده
هدف:اخیرا ماهیت پرتوانی سلولهای بنیادی اسپرماتوگونی (Spermatogonial Stem Cells, SSCs) در محیط کشت مورد توجه قرار گرفته است. هدف از تحقیق حاضر تولید سلولهای شبه بنیادی جنینی ES-like cells) (Embryonic Stem like cells, از SSCs و بررسی تغییرات مورفولوژیک و ژنتیکی در این سلولها نسبت به سلولهای بنیادی جنینی ESCs) (Embryonic stem cells, است. مواد و روشها: سلولهای اسپرماتوگونی ...
بیشتر
هدف:اخیرا ماهیت پرتوانی سلولهای بنیادی اسپرماتوگونی (Spermatogonial Stem Cells, SSCs) در محیط کشت مورد توجه قرار گرفته است. هدف از تحقیق حاضر تولید سلولهای شبه بنیادی جنینی ES-like cells) (Embryonic Stem like cells, از SSCs و بررسی تغییرات مورفولوژیک و ژنتیکی در این سلولها نسبت به سلولهای بنیادی جنینی ESCs) (Embryonic stem cells, است. مواد و روشها: سلولهای اسپرماتوگونی از بیضه موش نوزاد با استفاده از یک روش هضم مکانیکی و آنزیمی دو مرحلهای استخراج شده ودر محیط حاوی DMEM و FBS 15 درصد کشت داده شدند. بهطوریکه در پاساژ پنجم کلونی هایES-like cells حاصل شد. بیان ژنهای اختصاصی اسپرماتوگونی Stra8،,DAZLPlzfو ژنهای پرتوانی Nanog، SOX2، Klf4 بهروش RT-PCR، فعالیت آنزیم آلکالین فسفاتاز و نشانگر پرتوانی Oct4 بهروش ایمونوسیتوشیمی در سلولهایES-like cells بررسی و با سلولهای ESCs مقایسه شد. نتایج:ماهیتسلولهای ES-like cells حاصله توسط معیارهای نظیر مورفولوژی، میزان بالای فعالیت آلکالین فسفاتاز و نشانگر پرتوانی Oct4 مورد تایید قرار گرفت. طی تبدیل سلولهای اسپرماتوگونی به سلولهای ES-like cells بیان ژنهای اختصاصی نظیر Stra8،,DAZLPlzfکاهش و بیان ژنهای پرتوانی نظیر Nanog، SOX2، Klf4 افزایش مییابد. نتیجهگیری: کشت سلولهای اسپرماتوگونی منجر به تولید کلونیهای ES-like cellsمی شود این فرآیند همراه با تغییرات ژنتیکی گستردهای در بیان ژنهای اختصاصی اسپرماتوگونی و ژنهای پرتوانی در سلولهای ES-like cells میباشد. در مجموع سلولهای اسپرماتوگونی میتواند دریچهای بهسمت دستیابی به سلولهای پرتوان مورد استفاده قرار گیرد.