تاثیر نانو ذرات اکسید روی (ZnO) بر ویژگیهای جوانه زنی، بیوشیمیایی و فراساختار سلولی گیاه کرچک (L. communisRicinus)
دوره 8، شماره 2، تابستان 1396، صفحه 151-164
https://doi.org/10.52547/JCT.8.2.151
الهام اسپرهم، سکینه سعیدی سار، هما محمودزاده آخرت، محمدرضا هادی
چکیده هدف: این تحقیق بهمنظور مطالعه تاثیر غلظتهای مختلف نانوذرات اکسید روی بر جوانه زنی، مقدار رنگیزههای فتوسنتزی، محتوای قند و بررسی فراساختار برگ گیاه کرچک بود
مواد و روشها: آزمایش در شرایط کشت گلخانه به صورت کاملا تصادفی با 3 تکرار طراحی شد. گیاهان در معرض غلظتهای مختلف (صفر، 500،100،10 و1000میلی گرم بر لیتر) نانو ذرات اکسید روی قرار گرفتند. ویژگیهای فراساختاری برگ توسط میکروسکوپ الکترونی TEM در تیمار 1000میلی گرم بر لیتر مطالعه شد.
نتایج: تیمار گیاه با نانواکسید روی در غلظت10 میلی گرم برلیتر سبب افزایش و در غلظت بالاتر از 10 میلی گرم برلیتر بهطور معنیداری سبب کاهش در سرعت و درصد جوانه زنی، طول ریشهچه ،ساقه چه و میزان رنگیزههای فتوسنتزی شد. میزان قندهای محلول در برگ با افزایش غلظت نانو ذرات افزایش معنیداری پیدا کرد. تصاویر میکروسکوپ الکترونی TEM، تجمع نانو ذرات اکسید روی و از هم پاشیدگی دیواره و غشا سلولی و همچنین بد شکلی و کاهش تعداد کلروپلاستها را در تیمار 1000میلی گرم برلیتر در مقایسه با شاهد نشان داد.
نتیجهگیری: با کاربرد غلظتهای فزاینده نانو ذره اکسید روی یک تنش اکسیداتیو در گیاه کرچک بروز میکند که بهدنبال آن پارامترهای جوانه زنی و میزان رنگیزههای فتوسنتزی درآن کاهش یافته و آسیبهای فراساختاری در سلولهای برگ آن ایجاد میشود و گیاه در پاسخ به این تنش میزان قند خود را نیز افزایش میدهد.
تاثیر بیان بالای فاکتور مهار کننده لوسمی در سلولهای بنیادی مغز بر ساختار بافتی هیپوکامپ در موشهای ترانس ژن تولید شده بهروش TMGT
دوره 7، شماره 2، تابستان 1395، صفحه 159-170
https://doi.org/10.52547/JCT.7.2.159
شیما حسینی فر، صادق جوزایی، محمدرضا تابنده، محمود راهدار
چکیده هدف: فاکتور مهارکننده لوسمی (LIF) اثرات مفیدی بر عملکرد سلولهای بنیادی عصبی و درمان بیماریهای نورودژنراتیو دارد. اما اطلاعات محدودی در خصوص تأثیر بیان بالای LIF در سلولهای بنیادی عصبی بر تغییرات بافت مغز وجود دارد. در این پژوهش موشهای ترانسژن با بیان بالای هدفدار LIF تحت پروموتور نستین تولید و ساختار بافتی هیپوکامپ در آنها مطالعه شد.
مواد و روشها: بهمنظور تولید موشهای ترانسژن، نواحی پروموتوری پلاسمید pIRES2-EGFP با پروموتور دوم اینترون نستین و توالی تشدیدکننده Hsp68 جایگزین و بهصورت درون بیضهای (25 میکروگرم) به 10 موش صحرایی نر تزریق شد. پس از جفتگیری با موشهای ماده، تأیید ترانسژنی با استفاده از PCR معمولی، Real time PCR و میکروسکوپ فلوئورسنت انجام شد. از مغز موشهای صحرایی ترانسژن بالغ (4 ماهه) نمونهگیری و پس از تهیه مقاطع بافتی و رنگ آمیزی H&E ساختار بافتی هیپوکامپ در آنها بررسی شد.
نتایج: ژن LIF در سلولهای بنیادی هیپوکامپ نسبت به گروههای کنترل بیان بیشتری داشت (05/0p <). این یافته بههمراه مشاهده حضور پروتئین EGFP در نواحی تجمع سلولهای بنیادی نشاندهندة بروز ترانسژنی در زادهها بود. تعداد سلولهای الیگودندروسیت در هیپوکامپ موشهای ترانسژن نسبت به گروههای کنترل بهطور معنی داری بیشتر بود (05/0 p <).
نتیجهگیری: بیان بالای LIF در سلولهای بنیادی مغز موشهای صحرایی ترانسژن منجر به افزایش جمعیت سلولهای الیگودندروسیت در هیپوکامپ شد. از آنجا که تخریب سلولهای الیگودندروسیت در پیشرفت ضایعات نورودژنراتیو دارای نقش مهمی است ممکن است بتوان درصورت انتقال موفقیت آمیز LIF به مغز از این روش به منظور احیای تودة سلولهای الیگودندروسیت استفاده نمود.
تاثیر نانوذرات کبالت روی بیان ژنهای دخیل در مسیر بیوسنتز سزامین در کنجد (Sesamum indicum L.)
دوره 6، شماره 2، تابستان 1394، صفحه 165-176
https://doi.org/10.52547/JCT.6.2.165
مریم حیدری فر، فاطمه دهقان نیری
چکیده هدف: هدف از این پژوهش بررسی تاثیر غلظتهای مختلف نانوذرات کبالت بر میزان بیان ژنهای کلیدی دخیل در بیوسنتز سزامین شامل CYP81Q1، CYP81Q2، CYP81Q3 و C3H در کشت سوسپانسیون سلولی کنجد بود. مواد و روشها: ابتدا بهینهسازی سوسپانسیون سلولی کنجد انجام شد. برای این منظور از ریزنمونه هیپوکوتیل رقم کرج1، ساکارز، 6/0 میلیگرم در لیتر BAP و 3 میلیگرم در لیتر NAA استفاده شد. الیسیتور نانوکبالت با غلظتهای 25/0، 5/0 و 1 میلیگرم در لیتر در سوسپانسیون سلولی 18 روزه اعمال شد و نمونهبرداری در سه زمان 2، 8 و 24 ساعت پس از تیمار صورت گرفت. میزان بیان ژنهای کلیدی مسیر بیوسنتز سزامین با روش Real-Time qRT-PCR اندازهگیری شد. آنالیز دادهها و رسم نمودارها با استفاده از Excel انجام شد. نتایج: نتایج نشان داد که محیط MS حاوی 6/0 میلیگرم در لیتر BAP، 3 میلیگرم در لیتر NAA و 30 گرم در لیتر ساکارز، دمای ºC26، سرعت شیکر 130 دور در دقیقه و تاریکی برای تولید سوسپانسیون سلولی کنجد با غلظت بالای سلولها شرایط مناسبی هستند. افزودن نانوذرات کبالت به کشت سوسپانسیون منجر به افزایش سطح بیان ژنها در غلظت 5/0 میلیگرم در لیتر الیسیتور در زمانهای مختلف گردید. از آنجائیکه هیچ یک از سطوح مورد استفاده برای غلظت الیسیتور تاثیر منفی روی بیان ژنهای مذکور نداشتند میتوان اثر غلظتهای بالاتر را نیز روی میزان بیان این ژنها بررسی کرد. تاثیر منفی الیسیتور به معنی کاهش بیان ژنهاو کاهش میزان سزامین است. نتیجهگیری: براساس نتایج حاصل نانوکبالت باعث افزایش بیان ژنهای دخیل در سنتز سزامین میشود و بنابراین، از این الیسیتور میتوان برای القای بیان بیشتر ژنهای مذکور استفاده کرد.
ارزیابی رفتاری و بیوشیمیایی اثر نانواکسید منیزیم بر تخریب حافظه القا شده با محرومیت از خواب در موش صحرایی نر
دوره 10، شماره 3، پاییز 1398، صفحه 168-180
https://doi.org/10.52547/JCT.10.3.168
مرتضی زارعی، لطف اله خواجه پور، مهناز کسمتی، حسین نجفزاده
چکیده هدف: در این مطالعه اثر نانواکسید منیزیم بر یادگیری و حافظه و تغییرات بیوشیمیایی هیپوکمپ در موشهای صحرایی محروم شده از خواب، مورد ارزیابی قرار گرفته است.
مواد و روشها: در این مطالعه از موشهای نر در گروههای کنترل، محرومیت از خواب و دریافت کنندههای نانواکسید منیزیم با دوزهای 1 و 5 و 10 میلیگرم بر کیلوگرم، استفاده شد. جهت ارزیابی حافظه احترازی غیرفعال از دستگاه استپ ثرو استفاده شده است. جهت بررسی بیوشیمیایی از کیت آزمایشگاهی و بررسی قند خون از گلوکومتر استفاده شد.
نتایج: نتایج نشان داد که نانو اکسید منیزیم با دوز 10 میلیگرم بر کیلوگرم، باعث بهبود حافظه در موشها میشود که بهوسیله محرومیت از خواب دچار نقص حافظه شده بودند. علاوه بر تغییرات رفتاری فوق، مشاهده شد که محرومیت از خواب باعث کاهش سطح آمینواسید تاورین و افزایش قند خون وافزایش فعالیت آنزیم کولیناستراز میشود و تاثیر معنیداری بر فاکتور رشد مشتق از مغز نداشت. با بهکارگیری نانواکسید منیزیم، میزان قند خون و فعالیت آنزیم کولیناستراز، کاهش یافت ولی میزان آمینواسید تاورین تغییر نکرد.
نتیجهگیری: یافتهها نشان میدهند که نانواکسید منیزیم علاوه بر اثرات رفتاری باعث تغییر در میزان فاکتورهای بیوشیمیایی موثر بر حافظ میشود. بنابراین برای یافتن نحوه اثر مثبت این ماده بر حافظه، لازم است اثر این ماده بر سایر فاکتورهای موثر بر حافظه، نیز مورد بررسی قرار گیرد.
بررسی مقایسهای اثر عصاره گیاه یونجه پا کلاغی (Lotus corniculatus L.) و کرم فنی توئین 1 درصد بر التیام زخم پوست رت: مطالعه مورفومتریک و هیستوپاتولوژیک
دوره 2، پاییز 90، پاییز 1390، صفحه 213-224
https://doi.org/10.52547/JCT.2.3.213
چکیده هدف: هدف از این مطالعه بررسی التیام زخم پوستی پس از مصرف موضعی عصاره بخش های هوایی گیاه یونجه پا کلاغی در مقایسه با پماد فنی توئین در رت بود.
مواد و روشها: پس از القای بیهوشی در 80 سر موش صحرایی نر، زخمی مستطیل شکل در پشت هرکدام از آنها ایجاد شد. التیام زخم در 8 گروه شامل: کنترل (A)، کرم فنی توئین 1 درصد (B)، پماد عصاره 10 درصد (C)، پماد عصاره 20 درصد (D)، پماد عصاره 40 درصد (E)، کرم فنی توئین 1درصد + پماد عصاره 10 درصد (F)، کرم فنی توئین 1 درصد + پماد عصاره 20 درصد (G) و کرم فنی توئین 1 درصد + پماد عصاره 40 درصد(H) بررسی گردید. درمان و اندازه گیری زخم ها با آنالیز تصاویر دیجیتالی به مدت 21 روز صورت پذیرفت. جهت مطالعات میکروسکوپی در روزهای 3، 7، 14 و 21 از محل ترمیم نمونه برداری شد. التیام زخم برای همه گروههای تحت تیمار مشخص گردید. داده ها با نرم افزار SPSS18 آنالیز شدند.
نتایج: متوسط سطح زخم التیام یافته در گروههای E و H از متوسط سطح زخم سایر گروه ها کمتر بود (01/0>p ). همچنین بر اساس نتایج هیستوپاتولوژیکی برآیند کلی التیام زخم گروه های Eو H بهتر از سایر گروه ها بود.
نتیجه گیری: با توجه به اثرات ضد التهابی، ضد میکروبی و ترمیمی عصاره گیاه یونجه پا کلاغی در مقایسه با داروی فنی توئین 1 درصد میتوان اذعان نمود که ترکیبات موجود درگیاه عامل موثرتری در التیام زخم های جلدی تمام ضخامت میباشند.
مروری بر کاربرد نانوذرات اکسید روی در علوم زیستی
دوره 13، شماره 3، پاییز 1401، صفحه 215-234
https://doi.org/10.52547/JCT/13.3.215
لیلا سلطانی، طیبه محمدی
چکیده نانوتکنولوژی از شاخههای نوظهور علم است که استفاده گستردهای در زمینههای مختلفی چون پزشکی دارد. نانوذرات توسط ترکیبات مختلف در اندازه، شکل و خواص شیمیایی مختلف تولید میشوند و در زمینههای مختلف بیولوژیکی و زیستپزشکی قابل استفاده هستند. نانوذرات فلزی در بسیاری از زمینه ها استفاده گستردهای دارند و دارای خواص مختلفی هستند که آنها را برای استفاده در پزشکی مناسب می کند. روی بهدلیل دارا بودن نقش مهم در فرآیندهای بیولوژیکی متنوع از جمله تکوین جنین، رشد طبیعی، بهبود زخم، متابولیسم، ایمنی، عملکردهای شناختی، تولید اسپرم، معدنی شدن استخوان، فرآیندهای عصبی و آنزیمی، یک عنصر کمیاب ضروری تقریبا برای همه موجودات زنده است. در دهههای اخیر، نانوذرات اکسید روی به دلیل زیست سازگاری و سمیت کم، یکی از محبوبترین نانوذرات هستند که کاربردهای بیولوژیکی متعدد داشته و در زمینههای تجاری وسیعی از جمله کاربرد در صنایع مختلف مانند داروسازی، نساجی، رنگ، لاستیک، مهندسی بافت، عوامل ضد باکتری و ضد سرطان استفاده میشوند. امروزه، توجه قابل توجهی به کاربرد نانومواد در تنظیم تکثیر و تمایز سلول های بنیادی جهت کاربرد بیشتر در پزشکی بازساختی شده است. روی یکی از فراوان ترین فلزات کمیاب در بدن انسان است و گزارش شده است که برای بازسازی استخوان ضروری است. نانوذرات اکسید روی خواص ضد باکتریایی جذابی از خود نشان میدهند. تاکید ویژهای بر مکانیسمهای باکتری کشی و توقف رشد باکتری با تمرکزبر تولید گونههای واکنش پذیر اکسیژن(ROS) آنها شده است. ROS سبب آسیب دیواره سلولی به دلیل برهمکنش موضعی اکسید روی، افزایش نفوذپذیری غشاء، درونیسازی نانوذارت به دلیل از دست دادن نیروی محرکه پروتون و جذب یونهای سمی روی محلول بوده است. نانوذرات اکسید روی برای سلولهای سرطانی سمی هستند و از طریق آپوپتوزیس باعث مرگ سلولهای سرطانی میشوند. القای اتوفاژی با انحلال آنها در لیزوزومها برای آزاد کردن یونهای روی همبستگی مثبت داشته و یونهای روی آزاد شده از نانوذرات روی توانستند به لیزوزومها آسیب برسانند و منجر به اختلال در اتوفاژی و میتوکندری شوند. نانوساختارهای اکسید روی با دارا بودن فعالیت ضد میکروبی، استخوانزایی و رگزایی با فناوریهای ساختار افزا نیز ترکیب شدهاند تا در نهایت داربستهای هیبریدی پیشرفته جدید برای مهندسی بافت را طراحی کنند. بین کمبود روی و دیابت ارتباط وجود دارد و ممکن است بر پیشرفت دیابت نوع 2 نیز تاثیر بگذارد. چندین کمپلکس روی سنتز شده و ثابت شده است که در مدلهای دیابت جوندگان مؤثر است. ROS توسط نانوذرات اکسید فلزی تولید می شود که به طور قابل توجهی به تکثیر فیبروبلاست کمک میکند. پیوند متقابل سلولهای فیبروبلاست و نانوذرات اکسید روی تحت تأثیر مساحت سطح و اندازه نانوذرات قرار میگیرد. پانسمان نانوذرات اکسید روی باعث افزایش آپوپتوزیس، پاکسازی باکتری، فعال شدن پلاکت، نکروز بافتی، اپیتلیال شدن مجدد، تشکیل اسکار بافتی، حذف دبریها ، رگزایی و فعال شدن سلول های بنیادی از طریق بهبود زخم می شود. سیستمهای دارورسانی مبتنی بر نانوذرات میتوانند با آزاد کردن داروها به صورت آهسته و پایدار و رساندن آنها به ناحیه مورد نظر از بدن، بر محدودیتهای ذکر شده غلبه کنند. این مقاله مروری بر برخی تحقیقات مربوط به کاربرد نانوذرات اکسید روی در علوم زیستی است.
باززایی و تنوعات سوماتیکی در گیاه شمعدانی عطری ( L. Pelargonium roseum)
دوره 3، زمستان 91، زمستان 1391، صفحه 227-336
https://doi.org/10.52547/JCT.3.4.227
چکیده هدف: شمعدانی عطری (Pelargomium roseum L.) گیاهی زینتی با خواص ارزشمند دارویی میباشد. هدف از این مطالعه، بهینه سازی شرایط تکثیر و باززایی گیاه شمعدانی عطری و همچنین بررسی تنوعات سوماتیکی احتمالی گیاهان باززایی شده میباشد.
مواد و روشها: در این مطالعه ابتدا از گیاهان گلدانی جدا کشت هایی از ساقه که حاوی جوانه انتهایی و چند برگ کوچک بود تهیه و در محیط کشت MS پایه کشت داده شد. از گیاهان تکثیر شده، قطعاتی از ساقه و برگ انتخاب و به محیطهای کشت حاوی تنظیم کنندگان رشد مختلف جهت باززایی منتقل شد. از بین گیاهان باززایی شده چندین لاین از نظر مورفولوژیکی و همچنین تنوع ژنتیکی مورد ارزیابی قرار گرفت.
نتایج: بیشترین میزان تولید نوساقه و ریشه در محیط کشت حاوی 2 میلیگرم در لیتر BAP و 1/0 میلیگرم در لیتر NAA با بکارگیری جدا کشت برگ مشاهده شد. بررسی تنوعات سوماتیکی لاینهای باززایی شده اختلافاتی را از نظر شکل برگ و تعداد و نوع کرکهای برگ نسبت به شاهد و همچنین اختلافات ژنتیکی به صورت حذف و اضافه شدن باندها را در الگوی باندینگ DNAنشان داد.
نتیجه گیری: تولید نوساقه و ریشه با درصد متفاوت نشانگر اثر القایی محیط کشت ها و قطعات جدا کشت مختلف در باززایی این گیاه می باشد. تطابق اختلاف ژنتیکی گیاهان باززایی شده با تنوعات مورفولوژیکی احتمالا میتواند نشانگر پایه و اساس ژنتیکی تنوعات سوماتیکی ایجاد شده باشد.
الگوی توزیع سلولهای پانت در نواحی گوناگون رودهی کوچک در گوسفند و بز در سطح میکروسکوپ نوری و الکترونی
دوره 3، پاییز 91، پاییز 1391، صفحه 231-236
https://doi.org/10.52547/JCT.3.3.231
چکیده هدف: هدف از این مطالعه مقایسهی توزیع کمی و ویژگیهای بافتی سلولهای پانت رودهی کوچک در گوسفند و بز بود.
مواد و روشها: 10 راس گوسفند سالم بالغ (5 نر و 5 ماده) و 10 راس بز سالم بالغ (5 نر و 5 ماده) از نژاد لری بختیاری در کشتارگاه شهرکرد انتخاب شدند. مقاطع بافتی تهیه شده با میکروسکوپ نوری و الکترونی مورد بررسی قرار گرفتند.
نتایج: سلولهای پانت در نواحی گوناگون کریپتهای لیبرکوهن توزیع شده بودند و گرانولها در ناحیهی عمقی بزرگتر و فراوانتر بوده، شمار این سلولها از بخش ابتدایی دوازدهه بهسوی بخش انتهایی رودهی تهی، بهتدریج افزایش و از بخش انتهایی رودهی تهی به سوی بخش انتهایی ایلئوم کاهش یافته بود. در همهی نواحی، شمار سلولهای پانت در بز بیشتر از گوسفند بود. در سطح میکروسکوپ الکترونی، گرانولهای متراکم در سیتوپلاسم راسی سلولهای پانت یافت شدند. تراکم این گرانولها و نیز تراکم ریزپرزهای سطحی سلولها در رودهی تهی بیشترین و بهسوی دوازدهه و ایلئوم کمترین مقدار بود. در سه ناحیهی رودهی تهی ، میانگین مساحت گرانولهای سیتوپلاسمی در گوسفند بهطور معناداری بیشتر از بز بود.
نتیجهگیری: نتایج نشان داد که از دید میکروسکوپ نوری و الکترونی مشابهت فراوانی بین ساختار سلولی پانت بین دو گونه وجود دارد.
ارزیابی اثرات توکسیسیتی و ضد سرطانی فراکشن های حاصل از زهر مار کبری ایرانی Naja naja oxiana بر رده سلولی لوسمی لنفوبلاستیک حاد Jurkat E6.1))
دوره 8، شماره 3، پاییز 1396، صفحه 250-260
https://doi.org/10.52547/JCT.8.3.250
معصومه براتی، فاطمه داوودی دهاقانی
چکیده هدف: سرطان یک بیماری تهدید کننده زندگی که توسط تمایز کنترل نشده و تکثیری تعیین شده است. شیمی درمانی روش معمول در درمان سرطان است، اما تومورها اغلب به شیمی درمانی که منجر به عوارض جانبی بسیاری نیز میشود مقاومت نشان میدهند. بسیاری از سموم بیولوژیکی دارای ترکیبات فعال با فعالیت ضد توموری میباشند. این مطالعه جهت جستجوی یک عامل ضد سرطان از زهر مار کبری ایرانی انجام شد.
مواد و روشها: ابتدا زهر مار کبری ایرانی (Naja naja oxiana) لیوفیلیزه و سپس با استفاده از روش BCA تعیین غلظت شد. از روش کروماتوگرافی ژل فیلتراسیون (FPLC) و تعویض یونی، SDS-PAGE، جهت تخلیص زهر استفاده شد. فعالیت ضد سرطانی فراکشنها توسط تست MTT بر روی سلول Jurkat E6.1) ) بررسی شد.
نتایج: پیک سوم از کروماتوگرام FPLC دارای بیشترین اثر سمیت بود و جهت کروماتوگرافی تعویض یونی انتخاب شد. چهار پیک آنیونی و یک پیک کاتیونی جمع آوری شد. پیک دوم از کروماتوگرافی تعویض آنیونی دارای اثر سمی 1±43 درصد در مقدار5/1 میکروگرم بود. این فراکشن در سلول نرمال سمیتی حدود 1±8 درصد از خود نشان داد (05/0p≤).
نتیجه گیری: ترکیبات ضد سرطان طبیعی مشتق شده از سم Naja naja oxiana میتواند در مبارزه با سرطان کمک کننده باشد. این اولین گزارش از فراکشن ضد سرطان از مار کبری ایرانی با اثر سمیت بر روی سلول Jurkat E6.1 و اثر سمیت کمتر بر روی ی نرمال است.
مقایسه تاثیر Substance P هموسیستئینه و طبیعی بر رشد سلولهای PC12 در حضور سیستئین
دوره 9، شماره 3، پاییز 1397، صفحه 250-260
https://doi.org/10.52547/JCT.9.3.250
سمیرا داودمنش، محمد جعفر محمدیان
چکیده هدف: در این مطالعه تاثیر Substance Pهموسیستئینه در حضور سیستئین بر میزان رشد سلولهای سرطانی PC12 بررسی و نتایج با نوع طبیعی آن مقایسه شد.
مواد و روشها: سلولها در محیط کشت RPMI-Glutamax حاوی FBS، 10 درصد کشت داده شدند و فعالیت متابولیکی آنها در حضور غلظتهای مختلف پپتید و سیستئین با استفاده از تست MTT ارزیابی شد. سپس تغییرات ریخت شناسی سلولها با استفاده از میکروسکوپ تمایز فازی مطالعه شد. بهمنظور بررسی تاثیر حفاظتی پپتید هموسیستئینه در برابر H2O2، سلولها بهمدت 3 ساعت در حضور H2O2 با غلظت 150 میکروگرم بر میلیلیتر تیمار شد و میزان تولید نیتریک اکسید آنها بهروش رنگ سنجی گریس مورد بررسی قرار گرفت.
نتایج: نتایج نشان میدهد که هر دو نوع Substance p، در همه غلظتهای انتخابی موجب افزایش رشد سلولها و کاهش میزان NO در برابر سمیت H2O2شده است. بهویژه در غلظت 6 تا 10 مولار میزان رشد در حضور پپتید هموسیستئینه و طبیعی بهترتیب 65/78 درصد و 55/38 درصد افزایش داشته است که نشان میدهد نوع هموسیستئینه 1/40 درصد بیشتر از نوع طبیعی منجر به افزایش رشد شده است و میزان NO بهترتیب 36 درصد و 14 درصد کاهش داشته است. بنابراین Substance P هموسیستئینه توانسته 22 درصد بیشتر از نوع طبیعی سلولهای سرطانی PC12 را در برابر سمیت پراکسید هیدروژن محافظت کند.
نتیجهگیری:SP-H در شرایط پاتولوژیک میتواند از طریق کاهش تولید نیتریک اکسید باعث افزایش رشد سلولهای سرطانی شده و روند پیشرفت بیماری را تسریع بخشد.
ساخت و مشخصهیابی فوم گرافینی و استفاده از آن برای تحریک الکتریکی سلولهای بنیادی عصبی انسان
دوره 7، شماره 3، پاییز 1395، صفحه 259-273
https://doi.org/10.52547/JCT.7.3.259
فرهاد جهان تیغ، حسن نعناکار، سید محمدباقر قریشی
چکیده هدف: در این پژوهش از بستر زیستسازگار فوم گرافینی سهبعدی جهت کشت سلولهای بنیادی عصبی انسان استفاده شده است.
مواد و روشها: فوم گرافینی برای اولین بار توسط ته نشینی صفحههای اکسید گرافینی بر روی زیر لایهای از جنس پلیاتیلن ترفتالات (PET)تحت اشعهی فرابنفش و دمای 80 درجه سانتیگراد ساخته شده است و روش ساخت صفحههای اکسید گرافنی روش بهبود یافته هامرز است.
نتایج: با استفاده از میکروسکوپ الکترونی روبشی ضخامت فومهای ساخته شده در حدود 10 تا 50 میکرومتر اندازهگیری شد که در هر میکرومتر از آنها حدود 10 لایهی اکسید گرافینی وجود دارد. همچنین میکروسکوپ نیروی اتمی وجود گرافین تک لایه با ضخامت 4/1 نانومتر را در محلول اکسید گرافین نشان میدهد. طیف سنجی فوتو الکترون پرتوی ایکس احیای جزئی فوم اکسید گرافینی را طی مراحل ساخت تایید میکند. طیف سنجی رامان نیز وجود صفحههای اکسید گرافینی چند لایه را در ساختار فوم نشان میدهد. با استفاده از آزمون کششی، مدول یانگ این فومها در بهترین حالت حدود GPa7/1 بهدست آمد. علاوه بر این، مقاومت سطحی الکتریکی فومها با استفاده از روش پروب چهار نقطهای در حدود 17-24 Ω/sq اندازهگیری شد.
نتیجهگیری: با توجه بهروش پروب چهار نقطهای مشخص شد این مقاومت الکتریکی برای فراهم کردن جریان الکتریکی در حدود mA20 تحت ولتاژهایی پایینتر از V5/0 بهمنظور تحریک الکتریکی سلولهای بنیادی عصبی و تمایز آنها بهسمت نورونها (به نسبت سلولهای گلیال) مناسب است. تست زاویهی تماس نیز نشان داد که سطح مقطع فوم اکسید گرافینی پیچانده شده خاصیت فرا آبدوستی دارد که به القای تکثیر و تمایز موثر سلولهای بنیادی عصبی در سرتاسر تخلخل و سطوح داربست کمک میکند. تصاویر فلورسانس نیز نشان دادند تحریک الکتریکی سلولهای بنیادی عصبی منجر به رشد کواکسیال-شکل تارهای عصبی در جهتی مشخص و القای تمایز آنها بهسمت نورونها شده است. این نتایج فوم گرافینی را بهعنوان داربستی رسانا و منعطف برای بازتولید سیستمهای عصبی و مهندسی بافت پیشنهاد میدهد.
اثر عصاره الکلی خیار دریایی گونه خلیج فارس بر تمایز اوستئوژنیک و آدیپوژنیک سلول های بنیادی مزانشیمی مغز استخوان موش صحرایی
دوره 5، شماره 3، پاییز 1393، صفحه 273-280
https://doi.org/10.52547/JCT.5.3.273
جواد بهارآرا، الهه امینی، فریده نامور، مژگان سلطانی
چکیده هدف :خیار دریایی بهدلیل دارا بودن ترکیبات بیواکتیو مانند کندروئیتین سولفات در درمان بیماریهای استخوانی مورد توجه است. در زمینه بهکارگیری سلولهای بنیادی مزانشیمی در ترمیم آسیبهای استخوانی در سالهای اخیر پیشرفتهای خوبی انجام شده است. بنابراین پژوهش حاضر با هدف بررسی تمایز استئوژنیک و آدیپوژنیک عصاره الکلی خیار دریایی گونه خلیج فارس روی سلولهای بنیادی مغز استخوان موش صحرایی نر نژاد ویستار صورت گرفت. مواد و روشها: در این تحقیق تجربی آزمایشگاهی، سلولهای بنیادی مغزاستخوان موش صحرایی نر توسط فلاشینگ جداسازی و توسط ایمنوسیتوشیمی تایید گردیدند. سلولها در 9 گروه تجربی با دوزهای مختلف عصاره الکلی خیار دریایی 5/3، 25/6، 5/12، 25، 50، 100، 200، 400 و 800 میکروگرم بر میلی لیتر تیمار شده و با روش MTT سیتوتوکسیسیته عصاره مشخص گردید. 21 روز بعد، تمایز اوستئوژنیک و آدیپوژنیک توسط رنگآمیزی آلیزارین رد، اویل رد و کیت آلکالین فسفاتاز بررسی شد. داده های کمی توسط نرم افزار SPSS، آزمون ANOVA در سطح 05/0 p <تحلیل شدند. نتایج: دوز مناسب برای تیمار سلولهای بنیادی غلظتهای کمتر از 50 میکروگرم بر میلیلیتر تعیین شد. رنگآمیزی اویل رد نشان داد خیار دریایی قابلیت تمایز سلولهای بنیادی به دودمان آدیپوژنیک ندارد. رنگآمیزی آلیزارین رد و فعالیت آلکالین فسفاتاز نشان دادند دوز 25 میکروگرم بر میلیلیتر عصاره الکلی خیار دریایی موثرترین دوز تمایز سلولهای بنیادی به دودمان استئوژنیک است. نتیجهگیری: نتایج این پژوهش بیانگر پتانسیل تمایزی اوستئوژنیک عصاره خیار دریایی خلیج فارس بر سلولهای مزانشیمی مغز استخوان موش صحرایی میباشد.
بررسی اثر کلرید کبالت بر سطح برگ، کلروفیل، کاوتنوئید و بیان ژن ACC اکسیداز گیاه سیب زمینی Solanum tuberosum L. رقم وایت دزیره در کشت در شیشه
دوره 4، پاییز 92، پاییز 1392، صفحه 287-295
https://doi.org/10.52547/JCT.4.3.287
چکیده هدف: اتیلن یکی از هورمونهای گیاهی است که در شرایط کشت در شیشه تولید میشود و تجمع آن با کاهش رشد و تغییرات مورفولوژیکی گیاه همراه است. هدف این مطالعه بررسی اثر کلرید کبالت بهعنوان یک مهار کننده سنتز اتیلن بر رشد و برخی شاخصهای فیزیولوژیکی و بیان ژن (ACC) Aminocyclopropane 1-carboxylic acidاکسیداز سیب زمینی است.
مواد و روشها: در این مطالعه ابتدا جوانههای جانبی گیاه به مدت 5 هفته در محیط کشت MS حاوی غلظتهای صفر، 5، 10، 15، 20، 30، 40و 60 میلیگرم در لیتر CoCl2 در شرایط درون شیشه کشت داده شدند و غلظت بهینه انتخاب شد. سپس سطح برگ، میزان کلروفیل و کاروتنوئید و بیان ژن ACC اکسیداز بررسی شد.
نتایج: نتایج نشان داد که کلرید کبالت در محیط کشت از ایجاد ریشههای هوایی و نابجا جلوگیری کرد و سبب افزایش سطح برگ، میزان کلروفیل وکاروتنوئید شد. غلظت 20 میلیگرم در لیتر کلرید کبالت بهترین تاثیر را بر شاخصهای رویشی نشان داد. همچنین در این غلظت بیان ژن ACC اکسیداز نسبت به گیاه شاهد کاهش یافت.
نتیجه گیری: کبالت با کاهش بیان ژن ACC اکسیداز سبب کاهش تولید و تجمع اتیلن در کشت در شیشه میشود و در نهایت رشد گیاه سیب زمینی به خوبی بهبود مییابد.
ارزیابی بیان ژن MMP9 و اثر نانو ذرات نقره بر روی رده سلولی HT29 سرطان کولون
دوره 9، شماره 4، زمستان 1397، صفحه 344-352
https://doi.org/10.52547/JCT.9.4.344
بهاره حسنی درخشنده، سید عطا اله سادات شاندیز، مریم عباسی
چکیده هدف: نانوذرات نقره یکی از مهمترین نانو مواد تجاری محسوب میشود. از سوی دیگر سرطان یکی از چالشهای بزرگ و پیچیدهای است که بشر با آن دست و پنجه نرم میکند و راههای رسیدن برای جلوگیری یا درمان آن بسیار مهم و ضروری است. بر این اساس در این مطالعه به بررسی اثر سمیت نانو ذرات نقره سنتز شده بهروش زیستی بر روی سرطان کولون (HT29) و ارزیابی بیان ژن ماتریکس متالوپروتئیناز 9 (MMP9) پرداخته شد.
مواد و روشها: در این مطالعه، سنتز نانو ذرات نقره با استفاده از احیای یونهای نقره انجام گرفت و با کمک میکروسکوپ الکترونی عبوری مشخصهیابی شد. اثرات سمیت سلولی نانوذرات نقره بروی رده سلولی سرطانی کولون HT29 با روش رنگسنجی MTT مورد بررسی قرار گرفت. همچنین، در این مطالعه با استفاده از روش real time PCR به ارزیابی میزان بیان ژن MMP9 پرداخته شد.
نتایج: نتایج مشخصه یابی TEM نشان داد که نانوذرات اغلب شکل کروی داشته و میانگین اندازه آنها 22 نانومتر میباشند. نتایج نشان داد که نانوذرات نقره اثر کشندگی وابسته بهدوز و زمان داشته و میزان بقای سلولها را بهطور معنیداری کاهش میدهند (001/0p <). همچنین بین اختلاف غلظتها رابطه معنیداری دیده شد. بیان ژن MMP9 در سلولهای سرطانیHT29 تیمار شده با نانوذرات نقره بهمیزان 679 ٠٠/٠ ±٤٨٩٧/٠ (001/0p <) نسبت به نمونه شاهد کاهش نشان داد.
نتیجهگیری: نتایج این مطالعه نشان داد که نانوذرات سنتز شده بهروش سبز میتواند راهکار امیدوارکننده ای در درمان سرطان روده بزرگ مورد توجه قرار گیرد.
بررسی تاثیر امواج الکترومغناطیس با فرکانس پایین به همراه وین بلاستین در القای ناهنجاری های کروموزومی در سلول های L929 با استفاده از روش آزمون میکرونوکلئوس در سلولهای دو هسته ای
دوره 8، شماره 4، زمستان 1396، صفحه 354-363
https://doi.org/10.52547/JCT.8.4.354
مینا وفائی راد، فرهنگ حداد، مریم مقدم متین
چکیده هدف: در این مطالعه تاثیر ژنوتوکسیک امواج الکترومغناطیس در طول موج مشابه امواج تلفن همراه بهعنوان یک منبع رایج در تولید این امواج بههمراه یک آنیوژن شناخته شده (وین بلاستین) در سلولهای در محیط کشت بررسی شد.
مواد و روشها: سلولهای L929 بهمدت 2 ساعت تحت تاثیر میدان الکترومغناطیس بهدو شکل ثابت و منقطع با طول موج تقریبی MGh900 در حضور و عدم حضور ng/ml 5/1 وین بلاستین قرار گرفتند. بررسی صدمات کروموزومی با استفاده از آزمون میکرونوکلئوس در سلولهای دو هسته ای و توانایی زنده ماندن سلولها در تمامی تیمارها توسط آزمون MTT انجام شد.
نتایج: فراوانی میکرونوکلئوس در سلولهای تحت تاثیر میدان الکترومغناطیسی منقطع و پیوسته در مقایسه با میدان خاموش و گروه شاهد افزایش معنیداری را نشان داد. تیمار همزمان سلولها با وین بلاستین باعث افزایش بیشتر این فراوانی نگردید. بررسیها نشان داد که در هیچ یک از گروههای تیمارشده، کاهش قدرت زندگی رخ نداده است.
نتیجهگیری: نتایج بیانگر توانایی میدان الکترومغناطیس، بهخصوص بهصورت منقطع، در ایجاد صدمات کروموزومی است. تیمار همزمان میدان الکترومغناطیس و وین بلاستین، باعث افزایش بیشتر این صدمات نشد.
تغییرات پروتئین و سیستم آنتیاکسیدانتی خیار رقم اصفهانی در پاسخ به تنش خشکی
دوره 7، شماره 4، زمستان 1395، صفحه 375-385
https://doi.org/10.52547/JCT.7.4.375
فریبا امینی، مهری عسکری، مهناز حقیر
چکیده هدف: با توجه به اینکه ایران در دنیا یک منطقه خشک و نیمهخشک بهشمار میآید و همچنین یکی از کشورهای اصلی تولیدکننده خیار محسوب میشود بررسی اثرات خشکی بر این گیاه و تغییرات سیستم آنتیاکسیدانتی از اهمیت خاصی برخوردار است.
مواد و روشها: در این پژوهش خیار رقم اصفهانی در شرایط گلخانهای کشت داده شد و در مرحله 3 تا 5 برگی از رشد گیاه بهمنظور بررسی تغییرات پروتئینی و سیستم آنتیاکسیدانتی به مدت 21 روز در معرض چهار سطح از تنش خشکی (100، 75، 50 و 25 درصد ظرفیت زراعی) قرارگرفت و پاسخهای گیاه بررسی شد. میزان نشت الکترولیت، پراکسیداسیونلیپید، پروتئین، پرولین، آنتیاکسیدانت کل، کاتالاز و گایاکولپراکسیداز، αتوکوفرول و پراکسیدهیدروژن اندازهگیری شد.
نتایج: بررسی نتایج این مطالعه نشان داد که میزان نشت الکترولیت، پراکسیداسیون لیپید، پرولین، آنتیاکسیدانتکل، کاتالاز، گایاکولپراکسیداز ، αتوکوفرول و پراکسیدهیدروژن تحت تنش خشکی در مقایسه با نمونه شاهد افزایش یافت و تنها شاخص میزان پروتئین تحت تنش خشکی در مقایسه با نمونه شاهد کاهش یافت.
نتیجهگیری: نتایج این تحقیق نشان داد که احتمالا تحمل بهخشکی رقم خیار مورد نظر با توجه به فعالیتهای سیستم آنتیاکسیدانتی آنزیمی و غیرآنزیمی و همچنین تجمع پرولین صورت میگیرد.
بررسی ایمونوهیستوشیمیایی اثر هیپوتیروئیدی مادری در دوران بارداری و شیردهی بر تغییرات بیان لامینین در آلوئولهای ریه نوزادان رت نژاد ویستار
دوره 5، شماره 4، زمستان 1393، صفحه 379-384
https://doi.org/10.52547/JCT.5.4.379
زهرا هوشمند، مریم عامریون، ناصر مهدوی شهری، مهدی جلالی، محمدرضا نیکروش
چکیده هدف: در این مطالعه سعی شده است با استفاده از مطالعات ایمونوهیستوشیمی، بررسی اثر هیپوتیروئیدی مادری بر تغییرات بیان لامینین در آلوئولهای ریه نوزادان رت نژاد ویستار مورد بررسی قرار گیرد.
مواد و روشها: در این بررسی از رتهای ماده باکره نژاد ویستار استفاده شد. رتهای مادر در دو گروه تجربی (هیپوتیروئید و هیپوتیروئید تیمار شده با تیروکسین) و یک گروه کنترل (هر گروه شامل 12 رت) قرار گرفتند. در گروههای تجربی، رتها 14 روز قبل از جفتگیری بهترتیب در معرض داروهای ضدتیروئیدی پروپیل تیواوراسیل، با دوز 50 میلیگرم و بهطور همزمان داروهای پروپیل تیواوراسیل و لووتیروکسین، بهترتیب با دوزهای50 و 1میلیگرم در هر لیتر آب آشامیدنی قرار گرفتند. پس از 14 روز جهت اطمینان از تغییرات سطح هورمونها، از رتهای مادر تست خون گرفته و به آنها اجازه جفتگیری داده شد. سپس از ریه نوزادان 10 روزه جهت انجام مطالعات ایمنوهیستوشیمیایی نمونهبرداری بهعمل آمد.
نتایج: در آلوئولهای ریه، در گروه هیپوتیروئید کاهش معنیداری در بیان لامینین (001/0p= ) مشاهده شد، درحالیکه گروه هیپوتیروئید تیمار شده با تیروکسین تفاوت معنیداری را نسبت به گروه کنترل نشان نداد.
نتیجهگیری: هورمونهای تیروئیدی اثرات بسیار مهمی بر بیان لامینین و تکوین ریه دارند، بهطوریکه هیپوتیروئیدی مادری باعث کاهش قابل توجهی در بیان لامینین در آلوئولها میشود. بنابراین تغییر در میزان طبیعی هورمونهای تیروئیدی مادری میتواند باعث تغییرات گستردهای در تکوین آلوئولهای ریه جنین و نوزاد شود.
کاریولوژی ماهی سنگ لیس معمولی (Garra rufa) در رودخانه سمیرم استان اصفهان (پرتوبالگان: کپورماهیان)
دوره 6، شماره 3، پاییز 1394، صفحه 381-388
https://doi.org/10.52547/JCT.6.3.381
علی نظامالاسلامی، یزدان کیوانی، سالار درافشان
چکیده هدف: هدف از این پژوهش تعیین کاریوتایپ ماهی سنگ لیس معمولی Garra rufa)) متعلق به خانواده کپور ماهیان از رودخانه سمیرم )زیرحوضه کارون) در استان اصفهان بوده است. مواد و روشها: هفت نمونه ماهی سنگ لیس با تور پره صید و زنده به آزمایشگاه منتقل شد. با استفاده از روش له کردن آبشش و بخش قدامی بافت کلیه و رنگآمیزی گیمسا مورد مطالعه قرار گرفتند. سپس تقسیم میتوز با PHA تحریک و سایر مراحل روتین کاریولوژی انجام شد. نتایج: با شمارش تعداد کروموزومها در 50 پلاک متافازی متعلق به هفت قطعه ماهی سنگ لیس، عدد کروموزومی 48=n2 با فراوانی 52 درصد بیشترین فراوانی را داشت که شامل 34 کروموزوم متاسنتریک، 12 ساب متاسنتریک و 2 آکرو/ تلوسنتریک بود. تعداد بازوهای کروموزومی 94= FN بهدست آمد. بلندترین و کوتاهترین کروموزوم در این گونه کروموزومهای متاسنتریک بهترتیب با طول کل 40/6 و 67/1 میکرون بودند. نتیجهگیری: گزارش اعداد و فراوانیهای عدد کروموزومی مختلف و تنوع فرمول کروموزومی برای اینگونه و وجود تفاوتهای منطقهای نشاندهنده یا حالت پلیمورفیسم درونگونهای یا وجود گونههای مختلف از این ماهی میباشد که نیازمند بررسیهای بیشتر، خصوصاً مولکولی میباشد.
تکوین تخمک و مگاگامتوفیت در Adonis flammea Jacqu. : گزارش سقط تخمک و رویان
دوره 4، زمستان92، زمستان 1392، صفحه 397-405
https://doi.org/10.52547/JCT.4.4.397
چکیده هدف: با توجه به اینکه مطالعات کاربردی و مولکولی در Ranunculaceae در حال افزایش است، بررسی و درک تکوین گل در این تیره ضروری است. در این پژوهش مراحل و چگونگی تکوین تخمک در گیاه Adonis flammea بررسی شد.
مواد و روشها: گلهای جوان و غنچهها در مراحل مختلف برداشت، در FAA 70 تثبیت و در الکل 70 درصد نگهداری شدند. نمونهها پس از آبگیری و قالبگیری در پارافین، با میکروتوم برشگیری شدند .رنگ آمیزی با PAS و هماتوکسیلین انجام گرفت. لامهای تهیه شده از مراحل مختلف تکوینی با دقت با استفاده از میکروسکوپ نوری بررسی و عکسبرداری شدند.
نتایج: نتایج نشان داد تخمک ها در A. flammea از نوع واژگون، دو پوششی و پرخورش است. مجرای سفت با پوسته درونی تشکیل میشود. مگاسپروسیت پس از تقسیم میوز تترادهای با هر دو نوع آرایش خطی و غیرخطی را ایجاد می کند. تکوین کیسه رویانی از تیپ پلیگونوم پیروی میکند. سلولهای آنتیپُد پایا هستند که در مرحله اندوسپرم سلولی تحلیل میروند. ارتباطات سیتوپلاسمی سلولهای کیسه رویانی، تحلیل برخی از تخمکها و بهدنبال آن سقط تخمک و رویان در برخی از موارد مشاهده شدند.
نتیجه گیری: الگوهای تکوین تخمک و کیسه رویانی از نهاندانگان و تیپ پلیگونوم تبعیت می کنند. ولی پایایی آنتیپُدها، تشکیل کلاهک خورشی، ارتباطات سیتوپلاسمی بین سلولهای کیسه رویانی و عدم موفقیت در لقاح و سقط رویان در برخی از تخمکها از ویژگیهای گونه مورد مطالعه است که علت آن میتواند عوامل محیطی یا ژنتیکی باشد.
مکان یابی و بررسی اثر محیط های هیپر و هیپواسموتیک بر نحوه پراکندگی آنزیم Na+ ,K+-ATPase در توبول های کلیوی بچه ماهی هامور معمولی (Epinephelus coioides)
دوره 2، زمستان 90، زمستان 1390، صفحه 407-414
https://doi.org/10.52547/JCT.2.4.407
چکیده هدف: بافت شناسی نفرون های کلیوی بچه ماهی هامور معمولی (Epinephelus coioides) و مکان یابی آنزیم Na+/ K+-ATPase در خلال تنظیم اسمزی و تطابق با محیط های هیپو و هایپراسموتیک (ppt 60 و 10) با استفاده از روش ایمونوهیستوشیمی. مواد و روش ها: به منظور بافت شناسی نفرون های کلیوی از رنگ آمیزی هماتوکسیلین- ائوزین استفاده شد. مکان یابی ایمن یایی آنزیم K+-ATPase، Na+ نیز با استفاده از آنتی بادی های اولیه (IgGa5) و ثانویه FITC انجام شد. نتایج: مطالعات بافت شناسی نشان داد نفرون های کلیوی بچه ماهی هامور معمولی شامل جسمک کلیوی، قطعه گردنی، توبول پروکسیمال اولیه و ثانویه، توبول دیستال و جمع کننده می باشند. نتایج مطالعات ایمونوهیستوشیمیایی نیز نشان داد که در تیمار کنترل آنزیم مذکور در سمت قاعده ای- جانبی سلول های اپیتلیال توبول های کلیوی بچه ماهی هامور حضور داشته اما در گلومرول ها حضور ندارد. در محیط های هیپواسموتیک و هیپراسموتیک نیز به مانند تیمار کنترل آنزیم در سمت قاعده ای- جانبی سلول های اپیتلیال توبول ها حضور دارد اما در ساختار گلومرول ها حضور ندارد. نتیجه گیری: با توجه به اطلاعات بدست آمده در این تحقیق می توان به این نتیجه رسید که ساختار نفرون ها در کلیه ماهی هامور معمولی شبیه ساختار آن در سایر گونه های ماهیان یوری هالین می باشد. همچنین، حضور آنزیم در سمت قاعده ای- جانبی سلول های اپیتلیال کلیوی نشان دهنده حضور فعال این آنزیم در فرایند تنظیم اسمزی می باشد.
ساخت داربست طبیعی از عصب سیاتیک و ارزیابی توانایی زیستی سلولهای بنیادی مزانشیم مغز استخوان موش صحرایی کاشته شده بر روی آن
دوره 1، پاییز 89، پاییز 1389، صفحه 42-52
https://doi.org/10.52547/JCT.1.3.42
چکیده هدف: اخیرا استفاده از بافت بدون سلول به عنوان داربست طبیعی در مهندسی بافت مورد توجه پژوهشگران قرار گرفته است. هدف تهیه داربست طبیعی از عصب سیاتیک بدون سلول و ارزیابی توانایی زیستی سلولهای بنیادی مزانشیم مغز استخوان موش صحرایی کاشته شده برروی آن بود.
مواد و روشها: در این مطالعه تجربی سلولهای عصب سیاتیک با استفاده از تریتونX-100، سدیم دودسیل سولفات و سدیم دزوکسی کولات حذف و داربست طبیعی تهیه شد. سلولهای بنیادی مزانشیم مغز استخوان در محیط کشت DMEM (Dulbecco Modified Eagle Medium) حاوی 15% FBS (Fetal Bovine Serum) با روش سانتریفیوژ بر روی داربست کاشته شد. توانایی زیستی سلولها در 1، 5، 10، 15 و 20 روز پس از کاشت با آزمون MTT (3-(4,5-Dimethylthiazol-2-yl)-2,5-diphenyltetrazolium-bromide) ارزیابی گردید. مورفولوژی داربست و سلولهای مزانشیم کاشته شده بر روی آن توسط رنگ آمیزی های هماتوکسیلین-ائوزین و آکریدین اورنج بررسی شد. دادهها با روش آنالیز واریانس یک طرفه و تست Tukey در سطح p نتایج: مطالعات بافتشناسی حذف کامل سلولها از عصب سیاتیک تیمار شده با دترجنتهای فوق را نشان داد. تعداد سلولهای زنده بر روی داربست 20 روز بعد از کاشت نسبت به روزهای 1 و 5 افزایش معنیداری (p <0.05) را نشان داد اما افزایش معنی داری بین تعداد سلولها بر روی داربست طی روزهای 10، 15 و 20 مشاهده نشد (P>0.05).
نتیجه گیری: نتایج نشان داد که داربست طبیعی تهیه شده از عصب سیاتیک فاقد سلول دارای شرایط لازم برای کاشت، رشد و تکثیر سلولهای بنیادی مزانشیم مغز استخوان میباشد.
بررسی اثر میدانهای الکترومغناطیسی با فرکانس پایین بر روند اسپرماتوژنز و پروتئینهای سرم خون موش نژاد Balb/c
دوره 2، بهار 90، بهار 1390، صفحه 47-56
https://doi.org/10.52547/JCT.2.1.47
چکیده هدف: هدف این پژوهش تغییرات ایجاد شده توسط میدانهای الکترومغناطیسی با فرکانس پایین بر روند اسپرماتوژنز، میزان پروتئینهای سرم خون و فعالیت آنزیم آلکالین فسفاتاز موش Balb/c است.
مواد و روشها: موشهای نر بالغ نژاد Balb/c در گروههای کنترل، شم و تجربی دسته بندی شدند. در گروه تجربی موشها درون محفظه قرار گرفته و در معرض میدان الکترومغناطیسی با شدت 120 گوس، فرکانس 100 هرتز با شکل موج سینوسی یکسو شده به مدت 14 ساعت قرار گرفتند. پس از گذشت 48 ساعت، موشها وزن و کشته شدند. تعداد سلولهای زاینده در بیضه توسط آزمون هیستوتکنیک، سنجش سطح آنزیم آلکالین فسفاتاز توسط اتوآنالیزور و اندازهگیری پروتئینهای شاخص سرم خون توسط آزمون الکتروفورز مورد بررسی قرار گرفتند.
نتایج: هیچ گونه اختلاف معنیداری بین وزن موشها و بیضهها در بین گروهها مشاهده نشد. سلولهای اسپرماتوگونی و اسپرماتوسیت ثانویه در گروه تجربی نسبت به دو گروه دیگر افزایش معنیدار (p≤0.05) نشان دادند. سنجش درصد پروتئینهای سرم خون نشان داد که در بین پنج پروتئین شاخص خون، درصد آلفا1 گلوبولین در گروه تجربی نسبت به گروه های کنترل و شم کاهش معنیدار (p≤0.05) نشان داد، با این وجود ارزیابی فعالیت آلکالین فسفاتاز تفاوت معنیداری را نداشت.
نتیجه گیری: در معرض قرار دادن موشهای بالغ با میدان الکترومغناطیسی با فرکانس پایین (120 گوس، فرکانس 100 هرتز)، موجب تغییراتی در اسپرماتوژنز از جمله افزایش تعداد اسپرماتوسیت های ثانویه، ایجاد حالت سن سیتیوم در سلولهای اسپرماتوژنیک، تخریب بافت بینابینی بیضه شد که میتواند منجر به کاهش باروری در موشها شود.
قابلیت ترانسفکشن و ترانسدوکشن سلولهای جوجه رده LMH و مقایسه آن با سلولهای انسانی رده HEK-293T
دوره 1، زمستان 89، زمستان 1389، صفحه 47-56
https://doi.org/10.52547/JCT.1.4.47
چکیده هدف: هدف از این مطالعه بررسی کارائی جذب DNA و انتقال ژن به سلولهای کبدی جوجه نژاد لگهورن در دو سطح ترانسفکشن و ترانسدوکشن با لنتی ویروسهای نوترکیب و شدت بیان ترانسژن میباشد.
مواد و روشها:برای ترانسفکشن یا ترانسدوکشن ویروسی، سلولها در پلیتهای 96 خانه کشت داده شدند و در مراحل مختلف با میکروسکوپ فلورسنس مشاهده گردیدند. تعداد سلولهای GFP (Green Fluorescent Protein-positive) با نرم افزار Grid Cell Counter و شدت بیان ترانسژن با نرم افزار ImageJ محاسبه و دادهها با نرم افزار SPSS آنالیز شدند.
نتایج: بیان ژن GFP، در سطح ترانسفکشن، در سلولهای HEK Human Embryonic Kidney)) و LMH (Chicken hepatoma cell line) به ترتیب 6 ساعت و 9 ساعت بعد از انتقال ژن و در مرحله ترانسدوکشن به ترتیب 22 ساعت و 36 ساعت بعد مشاهده شدند. شمارش سلولهای GFp +، 48 ساعت پس از ترانسفکشن نشان دادکه سلول های HEK و LMH به ترتیب 40 درصد و 35 درصد DNA را دریافت و بیان کردهاند. این مقادیر در 72 ساعت بترتیب به 95 درصد و 48 درصد رسید. شمارش سلولهای مثبت 72 و 96 ساعت پس از ترانسدوکشن ویروسی نیز الگوئی مشابه از نظر دریافت DNA توسط دو رده سلولی مزبور را به اثبات رسانید. لیکن آنالیز شدت بیان GFP نشان داد که رده HEK و LMH بترتیب 74 درصد و 89 درصد GFP را با اختلاف معنیداری (p <0.01) بیان کردند.
نتیجه گیری: نتایج حاصله نشان داد که سلولهای HEK از قدرت جذب بالاتری برای دریافت DNA برخوردار هستند با این حال سلولهای LMH قادرند ژنهای خارجی را با شدت بیشتری بیان نمایند.
توالییابی ژن همساخت LEAFY در روپاس (Solanum villosum Mill.)
دوره 6، شماره 1، بهار 1394، صفحه 51-58
https://doi.org/10.52547/JCT.6.1.51
محسن اسدی خانوکی، فرخنده رضانژاد، غلامرضا شریفی سیرچی، حسینعلی ساسان
چکیده هدف: هدف از این تحقیق شناسایی همساخت این ژن در گونهای تاجریزی بهنام روپاس (Solanum villosum Mill.) است.
مواد و روشها: RNA کل از مریستم راس شاخساره استخراج و برای ساخت cDNA استفاده گردید. آغازگرهای اختصاصی بر اساس توالی ژنهای همساخت LEAFY در سایر گیاهان هم جنس و هم خانواده، طراحی و از آنها در واکنش RT-PCR استفاده گردید. محصول RT-PCR پس از خالص سازی، توالی یابی گردید.
نتایج: نتایج نشان دهنده تکثیر قطعه مورد نظر از ژن بهطول 540 نوکلئوتید بود که SvLFY نامگذاری شد. مقایسه توالی پروتئین استنباطی SvLFY، با پروتئینهای همساخت LEAFY در سایر گیاهان نشان دهنده شباهت زیاد این قطعه با ناحیه C ترمینال آن پروتئینها بود.
نتیجه گیری: این نتایج نشان میدهد که بهاحتمال SvLFY نیز همانند LEAFY در نمو گل نقش دارد و میتواند بهعنوان ژن تعیین هویت مریستم گل در روپاس عمل کند.
اثر مواجهات شغلی بر روی پارامترهای اسپرمی و ساختار کروماتین اسپرم
دوره 8، شماره 1، بهار 1396، صفحه 52-68
https://doi.org/10.52547/JCT.8.1.52
لیدا باباخواه، لیلا آزادی، مریم اربابیان، مرضیه تولائی، مهرنوش بهادرانی، محمد حسین نصراصفهانی
چکیده هدف: هدف از این پژوهش، پارامترهای اسپرمی (غلظت، تحرک و مورفولوژی) و وضعیت سلامت DNA اسپرم را در مردان ناباروری که در معرض مواجهات شغلی مختلف می باشند، است.
مواد و روشها: 152 مردی که برای اهداف تشخیصی به مرکز باروری و ناباروری مراجعه کرده بودند،( بهار 1393 تا پاییز 1395) وارد این مطالعه شدند. با همه شرکت کنندگان مصاحبه شد و نمونه مایع منی آنها برای بررسی پارامترهای اسپرمی و سلامت کروماتین اسپرم بهترتیب بر اساس پروتکل سازمان بهداشت جهانی و روش TUNEL جمعآوری شد.
نتایج: نتایج نشان میدهند که در مردانی که در معرض مواد شیمیایی، نشستن طولانی مدت و با فعالیت فیزیولوژیکی بالا می باشند، درصد تحرک اسپرم کمتر و درصد آسیب DNA اسپرم بیشتر از معیارهای ارائه شده در مقالات قبلی می باشد. بهعلاوه، در مردان با آسیبDNA بیشتر از 10 درصد، کاهش معنیداری در پارامترهای اسپرمی مشاهده شد.
نتیجهگیری: مواجهات شغلی دارای اثرات منفی بر روی کیفیت پارامترهای اسپرمی و سلامت کروماتین اسپرم می باشد، اما مطالعات بیشتری برای اثبات این نتایج لازم است.
